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星星草耐盐碱基因的分离及相关基因群的芯片分析(694567)
来源:中国论文门户网    作者:本站会员    编辑:无名    添加时间:2008-7-16 9:38:59
转贴于:中国论文门户网 http://www.59165.net
星星草(Puccinellia tenuiflora)广泛分布于松嫩平原的盐碱地,是一种耐盐碱能力很强的多年生禾本科植物。本试验的目的是通过抑制消减杂交技术结合cDNA微阵列技术分离盐碱诱导基因及与耐盐碱相关基因群。试验材料采用2004年5月份返碱期在黑龙江省青冈县天然盐碱地(pH9.5)草场采集的星星草作为盐碱胁迫材料(tester),同期日光温室培养土(pH5-6)条件下生长8周的星星草作为非盐碱胁迫材料(driver)。用上述两种材料制作成抑制消减文库。 本试验将抑制消减杂交第2次PCR的产物连接至pGEM-T载体中,随后转化到JM109感受态细胞,经蓝白斑筛选、培养后提取质粒DNA。应用测序试剂盒(Amersham)进行质粒DNA测序PCR反应,产物经纯化后在MegaBACE 500测序仪上测序。得出的序列经SeqClust2.1软件去除冗余,与NCBI数据库中序列进行比对得到部分基因的预测功能。 本试验共分离出2195条200bp以上的序列(平均长度391bp,最长片段1012bp)。通过去除冗余序列得到非重复序列1041条,经过SeqClust2.1软件拼接得到47...Puccinellia tenuiflora is a perennial graminaceous plant that has a strong tolerance to salt and alkali soil conditions. It distributes widely in the Songnen alkaline grassland. The purpose of this study was to get genes related to alkali-salt tolerance from Puccinellia tenuiflora using the technique of suppression subtractive hybridization (SSH), and to compare the expression pattern of genes in salt-stressed plants with that of the control by technique of cDNA microarray. Puccinellia tenuiflora plants, wh...
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